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技術(shù)文章

選擇基質(zhì)膠應(yīng)該從哪些方面入手

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  基質(zhì)膠為一種從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取出的基底膜基質(zhì),主要成分包含層粘連蛋白、IV型膠原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,還包含生長(zhǎng)因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等。
  BME的品質(zhì)和批間差會(huì)大大影響模型的可變性。挑選合適的BME要從四個(gè)關(guān)鍵要素入手:產(chǎn)品透明度、拉伸強(qiáng)度、蛋白質(zhì)濃度和細(xì)胞外基質(zhì)組成。
  透明度
  透明度高表明 BME 的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白由可溶、均一的混合物組成,相反,透明度低可能提示蛋白過(guò)早聚集或存在不溶性蛋白,這可能影響產(chǎn)品的性能和一致性。
  拉伸強(qiáng)度
  拉伸強(qiáng)度是指固化 BME 的硬度。濃縮基質(zhì)比稀釋基質(zhì)具有更高的拉伸強(qiáng)度,因?yàn)橄♂尰|(zhì)含有更低的蛋白質(zhì)濃度和更少的蛋白質(zhì)交聯(lián)。雖然培養(yǎng)的細(xì)胞和組織可能具有不同的硬度要求,但使用批次間拉伸強(qiáng)度一致的 BME 將提高實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)性。
  細(xì)胞外基質(zhì)成分
  BME 含有特定比例的膠原、層粘連蛋白、巢蛋白和硫酸肝素蛋白多糖。調(diào)整 BME 中細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的比例會(huì)影響細(xì)胞行為,因此使用蛋白組成一致的基質(zhì)將提高實(shí)驗(yàn)性能和可重復(fù)性。
  蛋白濃度
  高的蛋白濃度 BME 為研究人員提供了更大的應(yīng)用靈活性。它能夠在不犧牲基質(zhì)剛度或穩(wěn)定性的情況下,在 3D 培養(yǎng)時(shí)調(diào)整細(xì)胞的拉伸強(qiáng)度和 3D 包埋法圓頂?shù)男纬?。然而,濃度增加可?dǎo)致難以處理的可溶性基質(zhì)。

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